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Western blot實驗結果分析
發(fā)布時間: 2021-09-15 點擊次數(shù): 4521次Western blot實驗結果分析
①微笑條帶
解析:由于凝膠的中間部分凝固不均勻所致,多出現(xiàn)于較厚的凝膠
處理辦法:配膠時一定要充分混勻,待其充分凝固后再做后續(xù)試驗
②帶出現(xiàn)紋理現(xiàn)象
解析:樣品不溶性顆粒
處理辦法:加樣前最好是離心一下樣品
③電泳條帶粗
(這是個內(nèi)參 β-actin)
解析:蛋白樣品沒有濃縮,量太大
④條帶出現(xiàn)好多洞洞
解析:轉膜的時候沒有把三明治里的氣泡干掉
Western Blot是生物學上一種非常常用的實驗方法,與之相似的還有Southern Blot和Northern Blot。但 WB 失敗的情況也很多,有一些小技巧來盡量減少失敗的概率。
“我的 WB 又沒有雜出來,太桑心了"
“哇靠你的 WB 又沒有雜出來,用掉多少抗體了,還買進口的!"
“哇靠你的 WB 又沒有雜出來,卻一直一輪又一輪的占用著蛋白電泳儀,我等到黃花都謝了!"
這些聲音貫穿了很多人的整個研究生生涯,WB,虐你無數(shù)遍,然而鳳凰涅盤然后浴火重生,從 WB 中參悟到了正確應對失敗的人生道理。而在正確應對失敗的同時,我們也要學會如何避免失敗。
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