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siRNA轉染操作及要點
發(fā)布時間: 2023-08-07 點擊次數: 1045次轉染試劑儲存
轉染試劑-20°C避光保存,Trans Enhancer于2-8°C存放
體外轉染操作流程
1:細胞接種:轉染前一天接種細胞,使細胞在轉染時密度在30-50%
2:siRNA-Starvio 轉染復合物準備:Starvio 用25ulTrans Enhancer 稀釋室溫孵育5min將siRNA稀釋液與 Starvio 稀釋液混合(總體積50ul)
將轉染復合物加到培養(yǎng)的細胞內
注意事項
1:建議對轉染條件進行優(yōu)化,特別是第一次使用。例如:24孔培養(yǎng)板,siRNA 用量在 6、12、18、24、30 pmol之間調整;
2:Starvio 試劑用量在1.0-3.0ul之間調整;
3:轉染過程盡量不要使用抗生素,否則會導致細胞死亡;
4:增加計算接種細胞的數量,使轉染時細胞密度在30-50%左右。
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